葉綠素熒光儀熒光產生機理
熒光是一種光致發光的冷發光現象。當光照射到某些原子時,光的能量使原子核周圍的一些電子由原來的軌道躍遷到了能量更高的軌道,即從基態躍遷到*激發單線態或第二激發單線態等。*激發單線態或第二激發單線態等是不穩定的,所以會恢復基態,當電子由*激發單線態恢復到基態時,能量會以光的形式釋放,所以產生熒光。
另外,熒光是物質吸收光照或者其他電磁輻射后發出的光。大多數情況下,發光波長比吸收波長較長,能量更低。但是,當吸收強度較大時,可能發生雙光子吸收現象,導致輻射波長短于吸收波長的情況發生。當輻射波長與吸收波長相等時,既是共振熒光。常見的例子是物質吸收紫外光,發出可見波段熒光,我們生活中的熒光燈就是這個原理,涂覆在燈管的熒光粉吸收燈管中汞蒸氣發射的紫外光,而后由熒光粉發出可見光,實現人眼可見。
葉綠素熒光儀原理說明
葉片是進行光合作用的主要器官,葉綠體是進行光合作用的主要細胞器。葉綠體是由葉綠體膜包裹起來的組織,膜內主要含有基質、基粒、類囊體。葉綠體的光合色素主要集中在基粒之中,光能轉換為化學能的主要過程是在基粒中進行的。
在高等植物體內含有光合色素包括葉綠素和類胡蘿卜素兩種,一般情況下以3:1的比例存在于類囊體的膜中。葉綠素分為葉綠素a和葉綠素b,類胡蘿卜素分為胡蘿卜素和葉黃素。 葉綠素不溶于水,而溶于有機溶劑。從化學性質講,葉綠素是葉綠酸的產物,葉綠酸的兩個羥基分別被甲醇和葉綠醇酯化而得到的,對光、熱、酸敏感,能發生皂化反應,性質不穩定。
光合作用是高等植物從外界環境獲取能量的重要途徑,是高等植物進行生命活動的基礎。由綠色植物發射的葉綠素熒光以一種復雜的方式表達光合作用活性和行為。當光子照射綠色植物的葉片時,光能在葉片的分配有反射、透射和吸收等三種主要的去激途徑。葉綠素分子吸收的光能除了大部分進行光化學反應外,少部分會以熱耗散和熒光的方式釋放出來。
熒光產生的物理機制是斯托克斯位移,當一定波長的光子碰撞到葉綠素分子時,光子可能被分子吸收,使分子的能量升高,處于較高能態的分子是不穩定的,一般要通過釋放吸收的能量而回到穩定的基態即zui低能級,其中一部分將以輻射的形式回到基態。分子必須在吸收一定頻率范圍的激發光后,通過振動馳豫回到*激發電子態的zui低能級,由此向下的輻射躍遷才可能產生熒光,因此熒光的波長一般要比激發光的波長要長。
在植物光合作用過程中,葉綠素色素分子對光能的吸收及能量的轉變途徑中包括著極復雜的生物物理及生物化學過程。在葉綠體內激發能從葉綠素b向葉綠素a的傳遞效率幾乎達到100%,所以檢測不到葉綠素b的熒光,因此,在對葉綠素熒光進行分析時,通常是指葉綠素a發出的熒光,光合作用過程中有兩種不同的光化學反應,他們發生在相關聯的不同色素基團中,這些基團被稱為PSI和PSII。在常溫下,PSI色素系統基本不發熒光,接近95%的被檢測到的,葉綠素熒光信號來源于PSII相關的葉綠素分子,因此,我們研究的葉綠素熒光光譜主要由PSII相關葉綠素分子產生的。
Shutter葉綠素熒光儀產品特點
全自動開合葉室,程序控制葉室閉合進行暗適應測量,測量ΦII, FV/FM, PAR和溫度,快門實現葉綠素熒光誘導曲線、NPQ弛豫和RLC(快速光曲線),無人值守自動監測,自動增益和自動歸零功能:自動在野外進行正確設置,數據采集器可同時操作多個傳感器,簡單開關啟動水下或陸地測量程序,全防水可達50m,潛水堅固不銹鋼或工程塑料設計,擴展大型外殼與電池包,利用易用軟件選擇所供程序或設定程序,根據程序,可自動運行達72h,開合型傳感器可通過電腦控制,用于預田間實驗,增加數采可以擴展到多個傳感器(同時測量可達15個)。
Shutter葉綠素熒光儀參數
Fo, Fm, Fv/Fm, F, Fm’, Fo’, ΔF/Fm’, qP, qL, qN, NPQ, Y(NO), Y(NPQ), rETR, PAR, T等。
Shutter葉綠素熒光儀術指標
多輪飽和脈沖調制熒光(PAM)
激發光: 470 nm,小于1 umol m2 s-1
光化光 :白 LED,zui大光強3300 umol m2 s-1
飽和脈沖:白光LED,zui大光強7800 umol m2 s-1
PSI 激發光:遠紅光735 nm,zui大光強40 umol m2 s-1
PAR 傳感器: 余弦校正2Φ傳感器400-700 nm
溫度傳感器: 分辨率±0.1 °C,量程 -5~ +40 °C
操作溫度: 0 °C ~45 °C
儲存溫度: -5 °C~60°C
潛入 50 m深或5bar
電源: 16.8V 4.5Ah,可充電NiMH電池包
Shutter葉綠素熒光儀應用領域
陸生高等植物(包括作物、蔬菜、經濟作物、中草藥等)和水生高等植物,海草、珊瑚等的長期監測
植物光合作用研究
植物生理學、生態學、農學、林學、園藝學、遺傳育種、突變株和基因型篩選等
各種非生物逆境(冷、熱、旱、澇、UV、營養缺失等)和生物逆境(病蟲、病菌等)對植物的影響
濕地研究、潮間帶研究、水生生物研究、極地生物研究、污染生態學、珊瑚研究等
長期生態定位監測
植物防御破壞的措施
1、減少對光能的吸收,增加葉片的絨毛、蠟質,減少葉片與主莖夾角。
2、增強代謝能力,碳同化,光呼吸,氮代謝,
3、增加熱耗散,依賴葉黃素循環的熱耗散,狀態轉換,作用中心可逆失活